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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心細(xì)胞系倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞

倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞是倉(cāng)鼠B細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞系,兼具抗體分泌與無(wú)限增殖能力。常見(jiàn)株如145-2C11(抗CD3)和MR1(抗CD40L)。懸浮生長(zhǎng)于IMDM或1640培養(yǎng)基,用于單抗制備與免疫學(xué)研究。

更新時(shí)間:2026-03-13
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應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)

倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞

倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞是一款專(zhuān)門(mén)用于體外定量檢測(cè)該類(lèi)雜交細(xì)胞來(lái)源樣本中蛋白激酶C(PKC)含量的專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)試劑組合,核心應(yīng)用于基礎(chǔ)科研、單克隆抗體制備相關(guān)研究領(lǐng)域,尤其適配該類(lèi)雜交細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞增殖、抗體分泌調(diào)控及細(xì)胞篩選、培養(yǎng)優(yōu)化等相關(guān)研究。該類(lèi)雜交細(xì)胞是由倉(cāng)鼠/小鼠骨髓瘤細(xì)胞與免疫B淋巴細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞,兼具骨髓瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力和B淋巴細(xì)胞合成分泌特異性抗體的特性,是單克隆抗體制備的核心工具細(xì)胞^。蛋白激酶C(Protein Kinase C, PKC)作為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路的關(guān)鍵絲an酸/蘇an酸蛋白激酶,廣泛存在于該類(lèi)雜交細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜及細(xì)胞培養(yǎng)液中,核心功能是介導(dǎo)細(xì)胞外信號(hào)(如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子)向細(xì)胞內(nèi)傳遞,調(diào)控該類(lèi)雜交細(xì)胞增殖、存活、抗體分泌及克隆化培養(yǎng)效率,其表達(dá)及活性異常與該類(lèi)雜交細(xì)胞狀態(tài)異常、抗體分泌能力下降、細(xì)胞凋亡密切相關(guān),是該類(lèi)雜交細(xì)胞功能調(diào)控、單克隆抗體制備優(yōu)化及相關(guān)機(jī)制研究的核心檢測(cè)指標(biāo)。本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)原理設(shè)計(jì),針對(duì)該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本特性?xún)?yōu)化反應(yīng)體系,集成了檢測(cè)所需全部試劑,具備特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作便捷、結(jié)果穩(wěn)定、物種適配性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì),可快速、精準(zhǔn)完成該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)樣本中PKC的定量檢測(cè),為該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)化、單克隆抗體制備及細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)提供標(biāo)準(zhǔn)化、可靠的數(shù)據(jù)支撐,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)科研場(chǎng)景的檢測(cè)需求。

檢測(cè)原理

本試劑盒采用雙抗體一步夾心法ELISA原理,專(zhuān)門(mén)針對(duì)該類(lèi)雜交細(xì)胞來(lái)源的PKC優(yōu)化反應(yīng)體系,有效規(guī)避倉(cāng)鼠/小鼠體內(nèi)其他蛋白激酶家族成員(如PKA、MAPK、AKT)、免疫球蛋白(該類(lèi)雜交細(xì)胞分泌抗體)及雜蛋白的交叉干擾,同時(shí)適配該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)體系中血清、培養(yǎng)基成分的干擾,確保檢測(cè)精準(zhǔn)度與適用性,契合該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)激酶檢測(cè)的核心需求:
酶標(biāo)板預(yù)先包被倉(cāng)鼠/小鼠PKC特異性捕獲抗體,實(shí)驗(yàn)時(shí)依次加入該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本(細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)液)、標(biāo)準(zhǔn)品及HRP標(biāo)記的倉(cāng)鼠/小鼠PKC檢測(cè)抗體,經(jīng)37℃恒溫溫育后,抗體與樣本/標(biāo)準(zhǔn)品中的PKC特異性結(jié)合,形成“捕獲抗體-PKC-檢測(cè)抗體"復(fù)合物;經(jīng)徹di洗滌去除未結(jié)合的多余試劑(如未結(jié)合的檢測(cè)抗體、雜蛋白、該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)體系中的血清成分、培養(yǎng)基雜質(zhì))后,加入TMB底物液,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,加入終止液(硫酸溶液)后變?yōu)辄S色,顏色深淺與樣本中該類(lèi)雜交細(xì)胞來(lái)源PKC的含量呈正相關(guān),通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)即可計(jì)算出樣本中PKC的具體含量。該原理適配該類(lèi)雜交細(xì)胞低濃度PKC檢測(cè),可有效避免細(xì)胞培養(yǎng)體系雜質(zhì)、分泌型抗體及其他蛋白激酶的非特異性結(jié)合,保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,尤其適配該類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)液等樣本的精準(zhǔn)檢測(cè),適配該類(lèi)雜交細(xì)胞克隆化培養(yǎng)過(guò)程中的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)需求。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.  物種適配性強(qiáng),無(wú)交叉干擾:采用倉(cāng)鼠/小鼠PKC專(zhuān)屬特異性單克隆抗體,可特異性識(shí)別該類(lèi)雜交細(xì)胞來(lái)源的PKC,有效規(guī)避人源及其他物種同源蛋白激酶的干擾,同時(shí)可有效排除該類(lèi)雜交細(xì)胞分泌的免疫球蛋白、細(xì)胞培養(yǎng)體系中血清蛋白、培養(yǎng)基成分及其他蛋白激酶(PKA、MAPK、AKT等)的干擾,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,批內(nèi)變異系數(shù)CV<5%,板間變異系數(shù)CV<8%,交叉反應(yīng)率<5%,保障該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的重復(fù)性,適配單克隆抗體制備過(guò)程中的精準(zhǔn)檢測(cè)需求。
2.  靈敏度高,檢測(cè)范圍廣:ELISA法檢測(cè)范圍通常為1-100ng/mL,靈敏度可達(dá)0.5ng/mL,可精準(zhǔn)檢測(cè)該類(lèi)雜交細(xì)胞低濃度樣本(如該類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)液、克隆化培養(yǎng)孔上清液)中的PKC,滿(mǎn)足該類(lèi)雜交細(xì)胞不同培養(yǎng)階段(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期、凋亡期)的檢測(cè)需求,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)R2≥0.99,線(xiàn)性表現(xiàn)優(yōu)異,可精準(zhǔn)區(qū)分該類(lèi)雜交細(xì)胞正常狀態(tài)與異常狀態(tài)下的PKC水平差異,為該類(lèi)雜交細(xì)胞篩選、培養(yǎng)條件優(yōu)化提供數(shù)據(jù)支撐。
3.  操作便捷,效率高效:試劑盒包含檢測(cè)所需全部試劑(預(yù)包被酶標(biāo)板、凍干標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體、濃縮洗滌液、TMB底物液、終止液、封板膜等),無(wú)需額外配制核心試劑,實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)化,全程可在1-2小時(shí)內(nèi)完成,適配96孔板高通量設(shè)計(jì),單次可檢測(cè)96個(gè)樣本,可同步檢測(cè)該類(lèi)雜交細(xì)胞克隆化培養(yǎng)的多組樣本,大幅提升實(shí)驗(yàn)效率,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞大規(guī)模篩選場(chǎng)景,新手也可輕松操作。
4.  穩(wěn)定性好,保質(zhì)期長(zhǎng):試劑經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)檢與工藝優(yōu)化,針對(duì)該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本特性?xún)?yōu)化試劑配方,凍干標(biāo)準(zhǔn)品、特異性抗體及底物活性穩(wěn)定,未開(kāi)封試劑盒按要求儲(chǔ)存可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上,稀釋后的試劑可短期冷藏使用,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的活性下降,確保不同批次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性,保障該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性;標(biāo)準(zhǔn)品采用專(zhuān)用PKC保護(hù)緩沖液配制,密封性好,可有效防止降解,進(jìn)一步提升試劑穩(wěn)定性,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)監(jiān)測(cè)需求。
5.  適配性廣,場(chǎng)景多元:專(zhuān)門(mén)適配該類(lèi)雜交細(xì)胞來(lái)源樣本檢測(cè),兼容該類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液(如NS1、SP2/O、CHO類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液)、細(xì)胞培養(yǎng)液、克隆化培養(yǎng)孔上清液等多種樣本類(lèi)型^,廣泛應(yīng)用于該類(lèi)雜交細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞增殖調(diào)控、抗體分泌機(jī)制、細(xì)胞篩選與培養(yǎng)優(yōu)化、單克隆抗體制備等相關(guān)科研領(lǐng)域^,適配基礎(chǔ)科研、單克隆抗體制備、該類(lèi)雜交細(xì)胞系構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。
6.  安全便捷,風(fēng)險(xiǎn)可控:優(yōu)化試劑配方,無(wú)需氯仿、二氯甲烷等有毒有機(jī)溶劑,操作過(guò)程更安全,同時(shí)配套詳細(xì)說(shuō)明書(shū),明確該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本處理、實(shí)驗(yàn)操作步驟及注意事項(xiàng),降低實(shí)驗(yàn)失誤概率,保障實(shí)驗(yàn)安全與順利進(jìn)行;試劑組分均經(jīng)過(guò)無(wú)菌檢測(cè),可有效避免污染風(fēng)險(xiǎn),適配該類(lèi)雜交細(xì)胞無(wú)菌培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作,契合該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌要求^。

適用樣本類(lèi)型

本試劑盒專(zhuān)門(mén)適配該類(lèi)雜交細(xì)胞來(lái)源樣本,可滿(mǎn)足該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)的多樣化檢測(cè)需求,具體適用樣本包括:該類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液(如NS1、SP2/O、CHO類(lèi)雜交細(xì)胞)、該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)液、克隆化培養(yǎng)孔上清液。其中,該類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液需用預(yù)冷專(zhuān)用裂解液(含蛋白酶抑制劑更佳)制備,低溫冰浴操作,輕柔吹打細(xì)胞,避免劇烈震蕩導(dǎo)致細(xì)胞破碎不充分或PKC降解,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞懸浮或輕微貼壁生長(zhǎng)的特性^;細(xì)胞培養(yǎng)液、克隆化培養(yǎng)孔上清液需低溫離心處理,去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì),新鮮樣本優(yōu)先檢測(cè),若無(wú)法立即檢測(cè)需分裝冷凍保存,避免反復(fù)凍融;該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本采集需在無(wú)菌條件下進(jìn)行,契合該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌規(guī)范^,避免微生物污染影響檢測(cè)結(jié)果;細(xì)胞裂解過(guò)程中可添加少量蛋白酶抑制劑,防止PKC降解,保障檢測(cè)準(zhǔn)確性。(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū))

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

(一)儲(chǔ)存條件

1.  未開(kāi)封試劑盒:需置于2-8℃避光密封保存,避免陽(yáng)光直射、溫度波動(dòng)及潮濕環(huán)境,嚴(yán)禁冷凍,未開(kāi)封試劑盒有效期通常為12個(gè)月,具體以說(shuō)明書(shū)標(biāo)注為準(zhǔn)。
2.  組分儲(chǔ)存:凍干標(biāo)準(zhǔn)品、倉(cāng)鼠/小鼠PKC特異性抗體、TMB底物液等核心組分需置于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(≤3次),防止活性喪失;濃縮洗滌液可在2-8℃冷藏保存;標(biāo)準(zhǔn)品及抗體母液稀釋后需存放于4℃,切勿放-20℃低溫處,以免降低效價(jià),稀釋后的抗體避免存放超過(guò)1天;建議在該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本處理時(shí)添加少量蛋白酶抑制劑,防止PKC降解,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本的特性需求。
3.  稀釋后試劑:稀釋后的洗滌液可在4℃冷藏保存,1周內(nèi)用完;稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體需現(xiàn)配現(xiàn)用,未用完的可短期冷藏,避免反復(fù)凍融及光照;試劑配制需注意保質(zhì)期,夏季即使冷藏也需避免批量配制過(guò)多,防止變質(zhì),適配該類(lèi)雜交細(xì)胞大規(guī)模檢測(cè)的試劑使用需求。
4.  運(yùn)輸條件:運(yùn)輸時(shí)采用凝膠冷藏包,確保試劑溫度穩(wěn)定在2-8℃,避免劇烈震蕩、暴曬及ji端溫度,防止試劑失效,尤其注意保護(hù)抗體及底物,避免光照直射和溫度驟變,保障試劑活性,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)的試劑使用需求。

(二)注意事項(xiàng)

1.  實(shí)驗(yàn)全程需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,實(shí)驗(yàn)器具需提前高壓滅菌處理,加樣時(shí)使用無(wú)菌槍頭,避免試劑及樣本污染,尤其是該類(lèi)雜交細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)液樣本,污染會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏高,同時(shí)契合該類(lèi)雜交細(xì)胞無(wú)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)要求^;實(shí)驗(yàn)臺(tái)面需保持清潔,避免試劑交叉污染,減少該類(lèi)雜交細(xì)胞培養(yǎng)體系中血清、培養(yǎng)基成分的基質(zhì)效應(yīng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。
2.  試劑使用前需從冰箱取出,置于室溫(25℃左右)平衡30分鐘以上,避免溫差導(dǎo)致冷凝水干擾實(shí)驗(yàn);試劑配制及加樣時(shí)動(dòng)作輕柔,避免劇烈震蕩,防止試劑失效或抗原抗體變性,同時(shí)避免PKC降解,抗體與樣本孵育時(shí)避免劇烈晃動(dòng),確??乖贵w充分結(jié)合;實(shí)驗(yàn)用蒸餾水或去離子水需新鮮、高質(zhì)量,自配緩沖液需檢測(cè)pH值,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本的檢測(cè)需求。
3.  孵育及顯色過(guò)程需嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間,尤其是顯色反應(yīng)需避光進(jìn)行,避免光照影響顯色效果;終止反應(yīng)后需在10分鐘內(nèi)完成讀數(shù),防止顏色消退,確保檢測(cè)數(shù)據(jù)穩(wěn)定,同時(shí)避免過(guò)度孵育導(dǎo)致非特異性顯色,保障該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
4.  不同批次的試劑不可混用,試劑盒配套試劑需單獨(dú)使用,避免與其他試劑盒試劑交叉使用,防止干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,廢棄試劑及耗材需按生物安全規(guī)范妥善處理,避免污染環(huán)境,尤其注意該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本及相關(guān)耗材的處理,契合生物安全實(shí)驗(yàn)規(guī)范^;含終止液的廢液需單獨(dú)收集處理,避免腐蝕設(shè)備。
5.  操作含硫酸的終止液時(shí),需佩戴手套、口罩、護(hù)目鏡,避免皮膚接觸及吸入,防止刺激傷害;實(shí)驗(yàn)臺(tái)面需保持清潔,避免試劑灑落,若不慎接觸皮膚,需立即用大量清水沖洗;試劑瓶蓋需及時(shí)蓋緊,防止揮發(fā)和污染,保障實(shí)驗(yàn)操作安全。
6.  若該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本中PKC含量超出檢測(cè)范圍,需適當(dāng)稀釋后重新檢測(cè),不可直接檢測(cè),以免導(dǎo)致結(jié)果偏差;檢測(cè)過(guò)程中可設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照,確保實(shí)驗(yàn)體系正常,陽(yáng)性對(duì)照孔吸光度需落在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍內(nèi),否則提示實(shí)驗(yàn)失效;該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本需新鮮采集處理,全程低溫操作并添加蛋白酶抑制劑,避免長(zhǎng)時(shí)間放置或反復(fù)凍融導(dǎo)致PKC降解,同時(shí)避免該類(lèi)雜交細(xì)胞分泌的抗體對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾;樣本中不可含NaN3,以免抑制HRP活性導(dǎo)致假陰性;避免樣本中細(xì)胞碎片、血清雜質(zhì)過(guò)多,可提前離心純化處理,適配該類(lèi)雜交細(xì)胞樣本的特性。

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